Cómo usar una cabina de flujo laminar – Guía completa de micología

La guía completa para usar una campana de flujo laminar en el cultivo estéril de hongos: qué es, cuándo la necesitas y cómo sacarle el máximo partido.

Si has pasado algo de tiempo en la comunidad del cultivo de hongos, habrás oído hablar de la campana de flujo laminar junto a las placas de agar, el grano inoculado y las jeringas de cultivo líquido. Se considera el estándar de oro del trabajo estéril: el equipo que separa a los cultivadores serios de los aficionados ocasionales. Pero ¿qué es exactamente una campana de flujo laminar, cuándo la necesitas de verdad y cómo se usa correctamente? Esta guía responde a todas esas preguntas con detalle.

¿Qué es una campana de flujo laminar?

Una campana de flujo laminar, también llamada mesa de trabajo limpia o cabina de flujo, es un puesto de trabajo cerrado que crea un entorno prácticamente libre de contaminación para tareas delicadas. Lo consigue haciendo pasar el aire de la habitación por un filtro HEPA (High-Efficiency Particulate Air), que retiene el 99,97 % de las partículas suspendidas en el aire de hasta 0,3 micras. El aire filtrado fluye después por la superficie de trabajo en una corriente constante y uniforme: esa es la parte «laminar». Como el aire se mueve en una sola dirección y sin turbulencias, los contaminantes se arrastran continuamente lejos de tus placas, tarros y cultivos abiertos en lugar de posarse sobre ellos.

El resultado es un espacio de trabajo que imita una sala blanca de laboratorio profesional (clasificación ISO 5 / Clase 100), pero con una fracción del coste y del espacio. Para el cultivo de hongos, esto significa que puedes abrir placas de Petri, verter agar, transferir micelio o inocular tarros de grano sin un riesgo relevante de que la contaminación del aire caiga sobre tu trabajo.

Campanas de flujo horizontal frente a vertical

Existen dos configuraciones principales, y la diferencia influye en tu forma de trabajar:

Para la mayoría de cultivadores domésticos y de pequeña escala comercial, la campana de flujo horizontal es la mejor opción. Te da un acceso cómodo y sin obstáculos a la superficie de trabajo y mantiene el flujo orientado de forma que cualquier contaminación de la habitación se empuja lejos de tus cultivos abiertos.

Campana de flujo laminar o still air box: ¿cuál necesitas?

Una caja de aire estático (still air box, SAB) funciona con otro principio: dentro de un contenedor cerrado el aire deja de moverse por completo, así que las partículas del aire caen hacia abajo en lugar de arremolinarse sobre tu trabajo. Es una solución económica y fácil de hacer en casa, perfectamente válida para muchas tareas de cultivo, sobre todo para inocular tarros de grano con hisopos de esporas o trabajar con huellas de esporas.

Una campana de flujo laminar sustituye activamente el aire alrededor de tu trabajo por una corriente constante de aire filtrado con HEPA. Es un enfoque mucho más fiable: en vez de esperar a que el aire se haya asentado lo suficiente, tienes un entorno continuo y controlado. La contrapartida es el coste y el espacio: una campana de calidad cuesta varios cientos de euros o más, mientras que una SAB se puede construir casi gratis.

Las still air box (SAB) existen en distintas formas y tamaños.

En resumen: empieza con una still air box. Cuando estés listo para trabajar de forma constante con placas de agar, preparar cultivos líquidos o ampliar tus cultivos, una campana de flujo laminar es la mejora que elimina casi todas las dudas del trabajo estéril.

Cuándo usar una campana de flujo laminar

Una campana de flujo laminar es la herramienta adecuada siempre que hagas un trabajo muy sensible a la contaminación del aire, en especial cualquier tarea en la que las superficies queden expuestas al aire libre más de unos pocos segundos. Los usos más habituales en el cultivo de hongos son:

Cómo usar una campana de flujo laminar: paso a paso

Tener una campana de flujo es solo la mitad del camino. Lo que realmente mantiene a raya la contaminación es usarla bien, con buena técnica dentro de la zona de aire limpio. Sigue estos pasos cada vez.

Tu campana produce aire limpio, pero no puede compensar una habitación llena de esporas en suspensión, caspa de mascotas o ventanas abiertas. Cierra todas las ventanas y puertas, apaga ventiladores y aire acondicionado y saca a las mascotas antes de empezar. Cuanto más limpia esté la habitación, menos trabajo tendrá que hacer tu filtro HEPA y más durará.

Antes de tocar nada estéril, dale tiempo a la campana para expulsar las partículas que se hayan podido depositar en la superficie del filtro o dentro de la carcasa desde tu última sesión. Este periodo de calentamiento asegura que el flujo laminar esté plenamente establecido y que el entorno dentro de la campana esté limpio. Algunos cultivadores la dejan funcionar 30 minutos completos antes de trabajar con agar; para inoculaciones, normalmente bastan 15 minutos.

Mientras la campana se calienta, limpia la superficie de trabajo y las paredes interiores con alcohol isopropílico al 70 %. No lo pulverices directamente sobre el filtro HEPA: con el tiempo puede dañar el material del filtro. Limpia con un paño sin pelusa o papel de cocina y deja que el alcohol se evapore del todo antes de empezar a trabajar. No uses IPA al 99 %: el mayor contenido de agua del IPA al 70 % ralentiza la evaporación y le da más tiempo de contacto con las paredes celulares de los microbios, lo que lo hace más eficaz como desinfectante. También puedes usar toallitas con alcohol para limpiar puntualmente durante la sesión. Consulta nuestra guía completa sobre métodos de esterilización y desinfección para saber más sobre por qué importa la concentración.

Reúne todo lo que necesites antes de empezar la sesión: tus hisopos de esporas, jeringas de cultivo líquido, tarros o placas, bisturís, un mechero de butano tipo soplete, toallitas con alcohol y cualquier otro material. Limpia el exterior de cada objeto con IPA al 70 % y deja que se seque. Coloca los objetos en un soporte o bandeja delante de la campana (todavía no dentro) para poder introducirlos según los necesites sin meter y sacar las manos constantemente, lo que altera el flujo de aire.

Los guantes de nitrilo eliminan la contaminación por huellas dactilares y permiten desinfectar las manos con spray entre pasos. Una mascarilla quirúrgica reduce de forma considerable las partículas que exhalas sobre los recipientes abiertos. Esto es especialmente importante cuando te inclinas sobre la superficie de trabajo en una campana horizontal: tu aliento avanza hacia la zona de aire limpio en lugar de ser empujado hacia atrás por el flujo. Reúne todo tu material básico de cultivo antes de empezar la sesión.

En una campana de flujo horizontal, el aire más limpio está justo en la cara del filtro y se va volviendo menos limpio a medida que te acercas a la apertura frontal. Coloca tus materiales más sensibles (placas de Petri abiertas, placas de agar, tarros de grano sin tapa) lo más cerca posible del fondo de la superficie de trabajo. Mantén el material al menos a 15 cm de la apertura frontal. Evita colocar objetos grandes entre el filtro y tus cultivos abiertos, ya que pueden crear turbulencias y zonas de sombra donde el flujo laminar se rompe.

Incluso dentro de una campana de flujo, la hoja del bisturí, el asa de inoculación o la aguja deben esterilizarse a la llama antes de cada transferencia. Mantén la punta metálica en la llama de un mechero de butano tipo soplete hasta que se ponga rojo anaranjado y déjala enfriar entre cinco y diez segundos antes de tocar cualquier sustrato o agar. Una herramienta caliente mata el micelio al contacto. Vuelve a flamear entre cada transferencia, y nunca des por hecho que una herramienta sigue estéril solo porque la hayas dejado sobre una superficie limpia.

Los movimientos rápidos de las manos dentro de la campana crean turbulencias que alteran el flujo laminar. Eso puede arrastrar aire de la habitación sin filtrar hasta la zona limpia, justo lo que quieres evitar. Muévete despacio y con método. Evita pasar el brazo por encima de recipientes abiertos; en su lugar, mueve el recipiente a una posición desde la que puedas acceder directamente. No hables, estornudes ni tosas hacia tu trabajo abierto: gira la cabeza hacia un lado, lejos de la campana, si hace falta.

Incluso en una campana de flujo, cuanto menos tiempo de exposición, menor riesgo de contaminación. Cuando abras tarros, vuelve a poner las tapas enseguida. Levanta la tapa de una placa de Petri solo lo necesario para la transferencia y ciérrala de inmediato. Trabaja con un recipiente cada vez en lugar de tener varios abiertos a la vez, salvo que la tarea lo requiera expresamente.

Al terminar, vuelve a limpiar la superficie de trabajo con IPA al 70 %. Retira todo el material del interior de la campana. Deja que siga funcionando cinco minutos para eliminar las partículas generadas durante la sesión y luego apágala. Nunca dejes material esterilizado dentro de la campana cuando esté apagada: sin flujo de aire, cualquier contaminación que caiga sobre él durante el apagado no tiene forma de ser eliminada.

Qué necesitas: lista de material para la campana de flujo laminar

Mantenimiento de la campana de flujo laminar

Una campana de flujo es tan buena como su filtro HEPA. Descuidar el mantenimiento provoca una reducción del caudal de aire, zonas muertas en el área de aire limpio y, al final, tasas de contaminación que anulan el sentido de tener la campana.

Errores habituales con la campana de flujo laminar

Aunque tengas la campana de flujo laminar en marcha, la contaminación puede aparecer igualmente si tu técnica falla. Estos son los errores que más cometen los cultivadores: